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解決方案
分子生物學

服務內容

服務要求

服務過程及提交結果

時間

服務費用(元)

1.普通PCR技術服務

1、請您提供新鮮的且盡量多的樣品(不少于100mg/樣品),或直接提供純化好的總DNA(大于5ug/樣品)。2、提供已知的全長基因序列。3、請提供詳細背景資料:DNA來源、豐度等

步驟:1)根據基因序列設計特異性的引物;2)提取DNA;3)PCR,實驗分析;4)提供完整的實驗報告(含電泳圖)及引物等實驗材料;

一周

1)DNA提取費用:120元/個;三個以上80元/個;2)PCR反應費用:單指標150元;三個指標以上80元/個;3)引物設計,引物合成均免費贈送。

2.轉化服務

質粒轉化:請您提供質粒,並說明質粒的大小、濃度、抗性以及拷貝數等背景資料,最好可以提供質粒圖譜。

提交結果:塗布後的平板。

2

80元/

酵母轉化:請您提供酶切消化好的線形DNA(已純化)、電擊細胞、平板。提交結果:塗布後的平板(依照您的要求選擇塗板量)

5

250元/個(500元/個,点击细胞和平板由我们提供;)

3.重組蛋白:大腸杆菌表達系統

1)目的基因來源爲人工合成基因片段、文庫篩選得到的克隆、PCR産物等。2)請提供目的DNA片段的序列信息。如客戶提供特殊載體,請提供抗性、多克隆位點、純化tag測序引物等信息。

1)按照客戶要求構建表達載體,並測序驗證序列正確。2)轉化目的菌株,篩選陽性克隆並按照誘導表達程序誘導目的蛋白表達。3)通過蛋白電泳和westonblot(客戶提供抗體)驗證蛋白表達並標示重組蛋白存在狀態。包涵體複性(如重組蛋白存在狀態爲包涵體)並柱層析純化小量重組蛋白。

30工作日

通用表達載體:15000元;客戶提供表達載體:15000元。

4重組蛋白:酵母表達系統

1)按照客戶要求構建表達載體,根據目的重組蛋白特性設計胞內表達或分泌表達方案,測序驗證序列是否正確。2)转化目的菌株,筛选阳性克隆并按照筛选程序进行抗性梯度筛选,从中选出0.1%-1%高表达菌株,通过southernblot分析插入位点和拷贝数,按照诱导表达程序诱导目的蛋白表达。3)通过蛋白电泳和Western Blot验证蛋白表达并标示重组蛋白存在状态。4)柱层析纯化小量重组蛋白并提供1mg样品;5)设计发酵条件并进行初步优化,服务结束后提供全部图片资料和实验记录资料。

90

細胞內表達:30000元;分泌型表達:45000元。

5隆構建

<1KB 2000元,1KB~2KB 4000元,>2KB 6000元

6.基因克隆技術

1. 亞克隆服務:A客户提供模板。将gene片断从质粒1中克隆到质粒2中; B客户提供模板,将gene1片断通过pcr等方法,进行客户所需要的修饰(如点突变,加尾等)成为gene2,然后克隆到质粒2中;

2.新基因克隆:A基因序列已知,客戶提供基因名稱,或者序列號,經我公司查詢和客戶確認後,克隆基因到目的載體;客戶還需提供cDNA模板或者組織、細胞等材料;B.基因序列未知,在新物種中克隆,客戶提供基因名稱,相關物種該基因的描述。客戶還需提供cDNA模板或者組織、細胞等材料;

一周

暫定:5000元/種

7.質粒抽提

提供甘油或穿刺保存菌種,請確保菌體活力較高,或將重新活化後的菌種

實驗報告(包括質粒電泳照片、鑒定結果及OD值測定結果,1.7<OD280/OD260<2.0的質粒,穿刺保存菌種;

一周

普通質粒:150/50ug;

超純質粒:300/50ug; 無內毒素質粒:300/50ug;

8.分子雜交服務

 

1.原位雜交;2.斑点杂交;3.Southern杂交;4. Northern杂交